1．用作叶酸拮抗剂（如甲氨蝶呤、乙胺嘧啶或甲氧苄啶等）的解毒剂。2．用于防治甲氨蝶呤过量或大剂量治疗后所引起的严重毒性作用。3．也可用于叶酸缺乏所引起的巨幼细胞性贫血的治疗。4．与5-氟尿嘧啶合用，用于治疗晚期结肠、直肠癌。